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單細(xì)胞全長轉(zhuǎn)錄組測序

組學(xué)測序

單細(xì)胞全長轉(zhuǎn)錄組測序

產(chǎn)品介紹

     基于隨機引物的策略方法,可以實現(xiàn)全樣本類型、全物種、全長單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組研究,并且大幅度提高了單細(xì)胞測序的基因檢出數(shù),將極大拓寬單細(xì)胞技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域。


產(chǎn)品特點

    可在單細(xì)胞水平準(zhǔn)確鑒定基因的可變剪接、可變多聚腺苷酸化(alternative polyadenylation, APA)、融合基因、基因家族和非編碼RNA等信息。

實驗方法

     通過高通量的單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組試劑盒、單細(xì)胞制備儀、分析軟件組成的完整平臺,可實現(xiàn)對每個樣本1000-20000個細(xì)胞進行全長無偏差的轉(zhuǎn)錄組檢測,并進行mRNA、非編碼RNA等研究。使用阻斷引物與裸露的單鏈DNA結(jié)合,通過多次退火和延伸進行原位阻斷。然后,隨機引物和oligo(dT)引物進入細(xì)胞核與RNA結(jié)合,對全轉(zhuǎn)錄組的RNA分子進行原位逆轉(zhuǎn)錄。通過末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)將 Poly(dA)原位添加到cDNA的3’末端。之后,基于單細(xì)胞平臺進行高通量單細(xì)胞核標(biāo)記。最后,進行純化、cDNA擴增、文庫構(gòu)建以及測序分析。

分析內(nèi)容

      細(xì)胞鑒定及基因表達定量、細(xì)胞亞群分析、APA分析、轉(zhuǎn)錄本融合發(fā)現(xiàn)、特征基因注釋、特征基因功能富集分析、蛋白調(diào)控網(wǎng)絡(luò)分析、轉(zhuǎn)錄因子分析、細(xì)胞周期分析、擬時序分析、RNA速度分析、細(xì)胞通訊分析、GSEA分析、腫瘤拷貝數(shù)變異分析、加權(quán)基因共表達網(wǎng)絡(luò)分析。

分析結(jié)果示例圖




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