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細(xì)胞增殖

細(xì)胞增殖

概念:

MTT(噻唑藍(lán))是一種具有細(xì)胞滲透性和正電荷的四唑染料,可以透過細(xì)胞膜被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成結(jié)晶狀的深紫色的甲臜產(chǎn)物,被適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑溶解之后可以在酶標(biāo)儀上讀取吸光值。用于檢測(cè)細(xì)胞增殖/毒性。

Cell counting kit-8(CCK8)是屬于MTT的升級(jí)產(chǎn)品,可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產(chǎn)物。使用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定OD值,間接反映活細(xì)胞數(shù)量和細(xì)胞增殖狀況。

原理與方法:

在96孔板中接種調(diào)整好濃度的細(xì)胞懸液,在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)24小時(shí)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要對(duì)培養(yǎng)板中的細(xì)胞進(jìn)行不同干預(yù)處理,并培養(yǎng)一段時(shí)間。向每孔加入10 μL CCK-8溶液(注意避免引入氣泡影響OD值的讀數(shù)),在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育~1小時(shí)。用酶標(biāo)儀測(cè)定在450 nm處的吸光度,計(jì)算細(xì)胞活率。


示例:

                                                                      CCK8檢測(cè)


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